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                      elisa試劑盒主要設備

                      發布時間: 2014-12-19  點擊次數: 1021次

                      elisa試劑盒試劑
                      (1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):
                      Na2CO3 1.59克
                      NaHCO3 2.93克
                      加蒸餾水至1000ml
                      (2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M
                      KH2PO4 0.2克
                      Na2HPO4·12H2O 2.9克
                      NaCl 8.0克
                      KCl 0.2克
                      Tween-20 0.05% 0.5ml
                      加蒸餾水至1000ml
                      (3) 稀釋液:
                      牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
                      加洗滌緩沖液至100ml
                      或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
                      (4) 終止液(3M H2SO4):
                      蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
                      (5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
                      0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
                      0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
                      加蒸餾水50ml。
                      (6) TMB(四甲基聯苯胺)使用液:
                      TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml
                      底物緩沖液(PH5.5) 10ml
                      0.75%H2O2 32μl
                      (7) ABTS使用液:
                      ABTS 0.5mg
                      底物緩沖液(PH5.5) 1ml
                      3%H2O2 2μl
                      (8) 抗原、抗體和酶標記抗體。
                      (9) 正常人血清和陽性對照血清。
                      器材
                      (1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
                      (2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
                      (3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
                      elisa試劑盒試驗原理
                      試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
                      自備材料
                      1. 蒸餾水。
                      2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
                      3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
                      elisa試劑盒安全性
                      1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
                      2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
                      3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
                      4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
                      5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
                      6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
                      7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
                      8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
                      9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
                      10. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
                      11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
                      12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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